1. Poletna aktivnost acetilholinesteraze, glutation-S-transferaze in katalaze v klapavicah (Mytilus galloprovincialis) iz slovenskega morjaTjaša Birsa, 2014, undergraduate thesis Found in: osebi Keywords: klapavice, acetilholinesteraza, glutation-S-transferaza, katalaza, biomonitoring, Jadransko morje, diplomske naloge Published: 19.02.2015; Views: 4354; Downloads: 361
Fulltext (814,32 KB) This document has many files! More...
|
2. Rapid and Sensitive Determination of ChE Activity in Blood PlasmaAndrej Jerkič, Tjaša Birsa, Mojca Žorž, Dorota Korte, Martina Bergant Marušič, Mladen Franko, 2018, published scientific conference contribution abstract Found in: osebi Keywords: flow injection analysis, thermal lens spectrometric detection, acetylcholinesterase, butyrylcholinesterase, enzyme activity Published: 16.07.2018; Views: 3350; Downloads: 0
Fulltext (642,94 KB) |
3. DOLOČANJE ACETILHOLINESTERAZE V HUMANIH KRVNIH VZORCIHTjaša Birsa, 2018, master's thesis Abstract: V strokovni literaturi zasledimo encim acetilholinesterazo (AChE) v različnih raziskavah s področja okoljevarstva, medicine in veterine. Zmanjšana encimska aktivnost je lahko indikator onesnaženosti okolja z organofosfatnimi in karbamatnimi pesticidi, policikličnimi aromatskimi ogljikovodiki ter težkimi kovinami. Spremembe v encimski aktivnosti AChE pa so tudi biološki označevalec nekaterih nevrodegenerativnih bolezni pri človeku.
V človeškem telesu se encim AChE primarno nahaja v živčnem sistemu, najdemo pa ga tudi v krvi, zlasti v membranah eritrocitov. V krvi je v večji meri prisoten tudi encim butirilholinesteraza (BChE), ki ravno tako spada v družino holinesteraz. Naš cilj je bil razviti metodo, ki bi omogočala specifično merjenje encimske aktivnosti AChE v okviru celotnih holinesteraz v krvnem serumu.
Za merjenje encimske aktivnosti smo uporabili Ellmanovo metodo. Količino obarvanih produktov reakcije smo določali s spektroskopijo s toplotnimi lečami TLS in z UV-VIS spektrofotometrijo. Z različnimi koncentracijami čistega encima AChE smo najprej določili mejo zaznavnosti obeh metod (LOD). Detekcija s TLS je bila bolj občutljiva, saj je bil LOD 3,13-krat manjši kot pri detekciji z UV-VIS. Potem smo izmerili encimsko aktivnost celotnih holinesteraz AChE in BChE v serumskih vzorcih zdravih ljudi. Izračunana encimska aktivnost holinesteraz se je v analiziranih vzorcih gibala med 3004 mU mL-1 in 5698 mU mL-1. Po dodatku specifičnega inhibitorja BChE se je celotna encimska aktivnost znižala za najmanj 60 %, kar kaže, da večina holinesteraz v krvnem serumu pripada BChE. Preizkusili smo tudi metodo enojne imunske precipitacije, vendar se je le-ta izkazala za neuspešno pri ločevanju posameznih holinesteraz iz serumskih vzorcev.
Na podlagi naših rezultatov smo prišli do zaključka, da je za merjenje encimske aktivnosti posameznih holinesteraz AChE in BChE v krvnem serumu najprimernejša uporaba specifičnih inhibitorjev, vendar bi bilo to metodo potrebno še dodatno optimizirati. Found in: osebi Keywords: acetilholinesteraza, krvni serum, nevrodegenerativne bolezni, spektroskopija s toplotnimi lečami, UV-VIS spektrofotometrija, imunska precipitacija. Published: 07.11.2018; Views: 4499; Downloads: 161
Fulltext (1,65 MB) |
4. |